BT-20人乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞基本屬性：

細(xì)胞詳細(xì)介紹：

傳代培養(yǎng)操作步驟：

一、貼壁培養(yǎng)

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。

（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底。

（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時(shí)，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。

（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。

（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。

二、懸浮細(xì)胞

傳代培養(yǎng)操作步驟如下：

一般實(shí)驗(yàn)室中懸浮細(xì)胞傳代方法分為直接傳代法和離心傳代法（培養(yǎng)液中含有細(xì)胞碎片的情況下）。當(dāng)在顯微鏡下觀察到懸浮細(xì)胞已經(jīng)長滿至80%~90%（細(xì)胞懸液變黃）時(shí)，即可進(jìn)行傳代。

（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。

（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時(shí)可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。

（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用。可根據(jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。

（4）消化細(xì)胞時(shí)應(yīng)避免消化時(shí)間過短導(dǎo)致消化不收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時(shí)間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時(shí)的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

（5）細(xì)胞離心的時(shí)候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴螅瑧?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。

（6）吹打細(xì)胞時(shí)應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。

公司正在出售的產(chǎn)品：

SK-OV-3(人卵巢癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠25-羥基維生3(HVD3)ELISA試劑盒 ZnT-1： 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 人角膜成纖維細(xì)胞 (HcorF)( 5×105 )

大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞;PC-12 [PC12] 小鼠25羥基維生3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA試劑盒 ZO-1： 胞質(zhì)緊密粘連蛋白1抗體 小鼠成肌細(xì)胞;C2C12 小鼠胰島細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL

EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 小鼠25羥基維生3(25(OH)D3/25 HVD3)ELISA 試劑盒 ZSWIM2： E3泛素蛋白連接酶ZSWIM2抗體 小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-B2

MRC-5細(xì)胞，人胚肺細(xì)胞 大鼠肺上皮Ⅱ型細(xì)胞,RLE-6TN細(xì)胞 T-109B彈性蛋白酶(含100mL酶解緩沖液)10mL 小鼠25羥基維生3(25 HVD3)ELISA試劑盒 ZSWIM3： ZSWIM3蛋白抗體 CD180 Others Human 人 CD180 / RP105 / LY64 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 小鼠25羥基(25-OHC)ELISA試劑盒 ZWILCH： 著絲粒ZWILCH蛋白抗體 人間充質(zhì)干細(xì)胞-臍帶 Human

MAEA： 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10抗體 CM-H070人腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

IFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Ierferon beta 蛋白 大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA 試劑盒 HAV IgG 抗-HAV (總)競爭法一步法

MYPN： 肌蛋白抗體 STAT6 Others Human 人 STAT6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

大鼠真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL 大鼠氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)ELISA試劑盒 sPLA2 (Rat secreted phospholipase A2,sPLA2)  大鼠分泌型0脂酶A2 96T

MTMR2： 肌管素相關(guān)蛋白2抗體 DU 145, 人前列腺癌細(xì)胞 腹水瘤,SAC-IIC3細(xì)胞 NCI-H2170 [H2170](人肺鱗狀細(xì)胞癌)

BT-20人乳腺癌細(xì)胞H1N1 Matrix Protein 1： A型病毒H1N1蛋白抗體 CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人臍血間質(zhì)干細(xì)胞 Human umbilical cord blood mesenchymal stem cells 人喋呤(MTX)ELISA 試劑盒 cath-L/CL peptide 組織蛋白酶L抗原 0.5mg

Hepatitis A virus polyprotein VP1： 甲型肝炎病毒聚蛋白VP1抗體 豬源細(xì)胞 皮膚細(xì)胞，CCD-1095Sk細(xì)胞 ZM755細(xì)胞，615小鼠滑膜肉瘤瘤株

MEN Others Mouse 小鼠 Meteorin / MEN 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 人脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG(PV-IgG)ELISA 試劑盒 CBFA1/RUNX2 (Runt-related Transcription Factor 2) 成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子(多肽) 0.5mg

HCLS1： 造血干細(xì)胞特異性蛋白抗體 CL-0294MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2